مقدمه
در برگ های پریوش دایمر آلکالوئیدهای ایندول ترینوئید(TIAs) وین پلاستین و وین کریستین تجمع می یابند. یکی از اولین محصولات طبیعی ضد سرطان که در پزشکی استفاده می شود و هنوز هم از جمله با ارزش ترین عوامل مورد استفاده در شیمی درمانی سرطان است) . اهمیت دارویی TIAs با توجه به فراوانی کم از آلکالوئیدهای ضد سرطان است. تحقیقاتی در زمینه تحریک شدید مسیر بیوسنتز TIAs انجام شده، که در حال حاضر پروانش یکی از گیاهان داروئی که گسترده ترین تحقیقات روی آن انجام می گردد. در حدود 130 TIAs از پریوش جداسازی شده و مشاهده شد که بیوسنتز وین بلاستین بسیار پیچیده است که حداقل 30 سیکل از آمینواسیدهای تریپتوفان و منوترپنوئید ژرانیول در آن دخالت دارند
همه آلکالوئیدهای پروانش پیش ماده معمول استریک توزیدین(Strictosidine)هستند، که هر کدام پس از مسیرTIAs تجزیه شده و به چند شاخه تقسیم می شوند که شامل یکی کوتاه که منجر به آجمالایسین و سرنیتین(به عنوان ضد فشار خون و آرام بخش استفاده می شود) و دو شاخه بلند که منجر به وین دولین و کاتارانتین می گردد. فراوانی پیش ماده مونومریک از نوع وین بلاستین و وین کریستین در برگ می باشد. در تحقیقات، باید خصوصیات کلیدی مرحله بیوسنتز TIAs ضد سرطان در اولین دایمریک(TIAs (dimericو4-anhydrovinblastin -α-3(AVLB) از وین دولین و کاتارانتین انجام داد. شناسایی پراکسیداز کلاسIII (Prx) از برگ همراه با فعالیت سنتزی AVLB و خالص سازی شده و سپس این آنزیم شناسایی شده که نام آن پراکسیدازI کاتارانتوس روزئوس که CroPrx1 نامگذاری شد.
2-3-1 جدا سازی و تعیین توالی CroPrx3. 5
2-3-2- آنالیزRT-PCR اندام های پراونش.. 5
2-3.3. جداسازی کامل cDNA از CroPrx3-a وCroPrx3-b. 7
2-4- تکثیر امتزاج های GFP-CroPrx3. 7
2-5-1- انتقال بیان در پروتوپلاستهای مزوفیل پروانش.. 9
2-5-2- تراریخته شدن پروتوپلاست های مزوفیل پروانش.. 10
3-2 طراحی امتزاج های GFP-CroPrx3 برای شناسایی و مرتب کردن CroPrx3 درون سلولی. 14
3-3- امتزاجهای GFP-Croprx3 که درون سلول مرتب شده اند در پروتوپلاست های مزوفیل پروانش.. 15
این فایل به صورت word و در 21 صفحه می باشد.
دانلود پروژه همسان سازی و شناسایی یک ژن کاندید از طریق انتقال بیان در پروتوپلاست های مزوفیل گیاه دارویی پروانش